
离心机是实验室常用的仪器之一,通过它完成常规的固液分离和样品分离纯化。 实验室离心机 通过转子高速运转产生的离心力将不同颗粒大小、不同密度的物质进行分离。对于实验室离心机的日常操作,安全是首要问题,只有正确使用实验室离心机才能确保操作的安全性。
以下几种类型离心机及相关设备耗材
实验室离心机
1、迷你离心机Mini4K/7K/10K/12K(1.5/2mL离心管;8联管)
2、微孔板离心机MiniG-2500(96孔板离心机)
3、台式高速冷冻离心机(SH2160R、MH3180R)
4、台式高速常温离心机(Ministar 21K、SH2160、MH3180)
5、台式低速冷冻离心机(M3250R、M4750R)
6、台式低速常温离心机(S400、M3050、M3250、M4750)
7、高低速通用离心机(MH4750(常温型)、MH4750R(冷冻型))
8、落地式高速冷冻离心机(HL10R、HL21R)
9、落地式低速冷冻离心机(L5500R、L6R、XL720R)
10、落地式低速常温离心机(L5500、L6M)
11、自动定位离心机模块KS-I
12、安全自动离心机KS-II
13、真空离心浓缩仪ZLNS-1
实验耗材
1、离心管(10ml/28ml/30ml/50ml/85ml/100ml/120ml)
2、离心瓶(250ml/300ml/450ml/500ml/750ml/1000ml/2000ml/2400ml)
离心配件
1、适配器(1.5ml转0.2/0.5ml、10ml转1.5/5ml、15ml转1.5/5ml、50ml转1.5/2/5/10/15ml、50ml尖圆底互转、100ml转5/10/15/50ml、250ml转10/15/50ml、500ml转5/10/15/50ml、750ml转15/50ml、1000ml转15/50ml)
2、套管(塑料套管10ml/15ml/20ml、不锈钢套管10ml/15ml/50ml/100ml)
实验室离心机操作规程
1、实验室离心机放置在水平坚实的地板或平台上,机器处于水平位置,以避免机器在离心过程中产生振动;
2、打开电源开关,根据需要安装所需的转子,将平衡好的样品放置在转子样品架上(离心筒必须与样品同时平衡),关闭实验室离心机盖子;
3、选择功能键,设置温度、速度、时间、加速度和减速度,微机控制的机器还需要按存储键来记住输入的信息;
4、按下启动按钮,实验室离心机将根据上述参数运行,并在预定时间自动关机;
5、在实验室离心机完全停止转动后打开盖子,取出离心样品,用柔软干净的布擦拭转子和机腔内壁,只有在离心机腔室内温度与室温平衡后才能盖上机盖。
实验室离心机注意事项
1、启动机器前,检查转头是否安装牢固,是否有异物落入机腔;
2、样品应预先平衡,并呈对角线放置。使用离心管进行离心时,离心管和样品应同时平衡;
3、离心挥发性或腐蚀性液体时,应使用带盖的离心管,以确保液体不会外漏,以免腐蚀机腔或造成事故;
4、离心过程中如发现异常,应立即停止运行,关闭电源,并报告仪器管理人员;
5、保持机腔内干燥。冷冻型离心机使用完后,用干抹布擦拭机腔内的水珠,然后打开机盖
高速冷冻离心机操作步骤
1.打开台式高速冷冻离心机电源开关,进入待机状态。
2.选择合适的转头:离心时离心管所盛液体不能超过总容量的2/3,否则液体,易
于溢出;使用前后应注意转头内有无漏出液体残余,应使之保持干燥。转换
转头时应注意使离心机转轴和转头的卡口卡牢。离心管平衡误差应在0.1克以内。
3.选择离心参数:
a)按温度设置按钮,再用数字键设置离心温度,回车确定。
b)按速度设置按钮,可在RPM/RCF设置档之间切换,用数字键设置离心速度,
回车确定。
c)按转头设置按钮,再用数字键设置转头型号,回车确定。
d)按时间设置按钮,再用数字键设置离心时间,回车确定。
e)离心机刹车或加速速度一般设置在0~4之间,不宜经常调整。
4.将平衡好的离心管对称放入转头内。盖好转头盖子拧紧螺丝。
5.按下离心机盖门,如盖门未盖牢,离心机将不能启动。
6.按START键,开始离心。离心开始后应等离心速度达到所设的速度时才能离
开,一旦发现离心机有异常(如不平衡而导致机器明显震动,或噪音很大),
应立即按STOP键,必要时直接按电源开关切断电源,停止离心,并找出原因。
7.机器如发现故障,请及时与有关人员联系。
8.使用结束后请清洁转头和离心机腔,不要关闭离心机盖,利于湿气蒸发。
9.使用结束后必须登记,注明使用情况。
高速冷冻离心机操作注意事项
1.台式高速冷冻离心机在预冷状态时,离心机盖必须关闭,离心结束后取出转头要倒置于实验台上,擦干腔内余水,离心机盖处于打开状态。
2.超速离心时,液体一定要加满离心管,应超离时需抽真空,只有加满才能避免离心管变形。如离心管盖子密封性差液体就不能加满,以防外溢,影响感应器正常工作。
3.转头在预冷时转头盖可摆放在离心机的平台上,或摆放在实验台上,千万不可不拧紧浮放在转头上,因为一旦误启动,转头盖就会飞出,造成事故!
4.转头盖在拧紧后一定要用手指触摸转头与转盖之间有无缝隙,如有缝隙要拧开重新拧紧,直至确认无缝隙方可启动离心机。
5.使用时一定要接地线。离心管内所加的物质应相对平衡,如引起两边不平衡,会对离心机成很大的损伤,至少将缩短离心机的使用寿命。
6.在离心过程中,操作人员不得离开离心机室,一旦发生异常情况操作人员不能关电源(POWER),要按STOP。在预冷前要填写好离心机使用记录。
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1、酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯萃取,高速离心后取上清,所得DNA大小为100-150kb
2、甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。
3、玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。
4、异丙醇沉淀法:基本同1法,仅用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)
5、表面活性剂快速制备法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。
6、加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。
7、碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和,离心后取上清,含少量DNA。
扩展资料:
DNA提取原则:
1、保证核酸一级结构的完整性;
2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子;
3、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度;
4、其他核酸分子,如RNA,也应尽量去除。
百度百科——DNA提取